La Master Mix contient tous les composants nécessaires pour la PCR, à l'exception de l'échantillon d'ADN à amplifier et les amorces spécifiques de la séquence à amplifier.

Pfu ADN polymérase
L'ADN polymérase est résistante à la chaleur et reste intacte pendant la dénaturation de l'ADN. Elle permet l'amplification de la séquence ADN cible.

Désoxynucleotides triphosphates (dNTPs)
Les dNTPs sont les 4 nucléotides de base : dATP, dCTP, dGTP, et dTTP. Les dNTPs sont les briques nécessaires à la construction de nouveaux brins d'ADN. Ces 4 nucloétides sont typiquement ajoutés à la réaction de PCR à des noveaux équimolaires pour une incorporation optimale. Dans les applications de PCR classiques, la concentration finale recommandée pour chaque dNTP est généralement de 0.2 mM.

Ions magnesium (Mg2+)
Les ions magnésium (Mg2+) fonctionnent comme un co-facteur pour l'activité de l'ADN polymérase en aidant à l'incorporation des dNTPs pendant la polymérisation. Les ions magnésium catalysent la formation de pont phosphodiester au niveau du site actif de l'enzyme entre l'extrémité 3' OH de l'amorce et le groupement phosphate du dNTP. De plus les ions Mg2+ facilitent la formation de complexes entre les amorces et l'ADN en stabilisant les charges négatives. Les ions Mg2+ sont présents dans le Master Mix sous forme d'une solution MgCl2.

Tampon
La PCR d'effectue dans un tampon qui apporte un environnement chimique nécessaire à l'activité de l'ADN polymérase. Ce tampon est généralement un tampon Tris/HCl avec un pH d'environ (typiquement 8.3-8.8). Une solution de KCl peur être ajoutée pour faciliter l'hybridation des primers mais la concentration ne doit pas excéder 50 mM pour ne pas inhiber l'enzyme.


Nous proposons un large choix de Master Mix pour la PCR. Voici une sélection avec les principales caractéristiques :

Nom	Pfu Mix (2x)	2x EsayPfu PCR SuperMix	2x TransStart FastPfu PCR SuperMix
Référence	NB-03-0095 and NB-03-0096	AS211	AS221
Type	Pfu polymerase	Pfu polymerase	Pfu polymerase
Vitesse	0.2-0.4 kb/min	0.5 kb/min	2-4 kb/min
Taille de l'amplicon	< 2 kb	< 10 kb	< 20 kb
Taux d'erreurs	2.6x10-6 erreurs / nt	3.9x10-6 erreurs / nt	1.2 x 10-7 erreurs / nt
Activité exonucléase 3'-5'	Oui	Oui	Oui