La coloration Oil Red O est basée sur l'utilisation d'un lysochrome (colorant lipo-soluble) et d'un colorant azoïque utilisé pour la visualisation des triglycérides neutres et des lipides sur des coupes de tissus.

Le colorant Oil Red O fait partie des colorants de type Sudan tels que le Sudan III, le Sudan IV et le Sudan Black B. Cependant, la coloration Oil Red O a peu à peu remplacé les colorations au Sudan III et au Sudan IV car la coloration rouge produite par le Oil Red O est beaucoup plus intense, ce qui facilite la visualisation.

La coloration Oil Red O se fait sur des échantillons frais ou congelés. Les tissus inclus en paraffine ne sont pas compatibles avec cette coloration car la préparation des coupes et surtout l'utilisation des solvants éliminent les lipides.

La coloration Oil Red O est basée sur l'utilisation de 4 réactifs pour la coloration des cellules adipeuses d'après la méthode de Johnson.