ADN polymérases pour échantillons difficiles
La PCR est un outil bien connu et efficace pour l'amplification de séquences d'ADN d'intérêt. Lorsque des séquences d'ADN avec une teneur en GC élevée sont amplifiées, la formation de produits de PCR peut souvent être compromise par une séparation de brin inadéquate et par la propension à la formation de structures secondaires complexes. L'incapacité de l'ADN polymérase à fonctionner à travers des régions de structure secondaire forte, telles que des "épingles à cheveux", conduit souvent à la formation de produits de PCR tronqués. En outre, les produits d'amplification mal définis sont prévalents lorsque les amorces sont riches en GC. Malgré les défis inhérents, la détection de séquences riches en GC devient de plus en plus importante pour le diagnostic moléculaire des maladies héréditaires.
L'amplification réussie d'échantillons difficiles (par exemple des séquences contenant des régions riches en GC) nécessite souvent l'addition de cosolvants (par exemple diméthylsulfoxyde (DMSO)) pour abaisser la température de séparation du brin d'ADN. Cependant, ce procédé a l'inconvénient d'inhiber l'activité enzymatique et de ralentir le taux d'extension - ce qui est un problème si seulement une petite quantité d'ADN est disponible.
Nous proposons des ADN polymérases avec des performances robustes dans une large gamme de modèles riches en GC et en AT. Ces ADN polymérases ont une tolérance améliorée aux inhibiteurs de PCR courants pour des échantillons bruts et / ou des extractions d'ADN.
