Colonnes FPLC pour les protéines natives

Les héparines sont des polysaccharides linéaires polydispersés chargés négativement qui ont la capacité de se lier à une large gamme de biomolécules comprenant des enzymes, des inhibiteurs de serine protease, des facteurs de croissance, des protéines de matrice extracellulaire, des enzymes de modification d'ADN et des récepteurs hormonaux. Lors de la chromatographie avec résine héparine, l'héparine n'est pas seulement un ligand d'affinité mais également un échangeur d'ions avec une densité de charge et une distribution élevées. La chromatographie par héparine est une chromatographie d'adsorption dans laquelle les biomolécules peuvent être adsorbées de façon spécifique et réversible par des héparines immobilisées sur un support insoluble. Un avantage de cette chromatographie est que les protéines de liaison à l'héparine peuvent être commodément enrichies en utilisant son effet de concentration. Ceci est particulièrement important pour séparer les protéines de faible abondance pour l'analyse en électrophorèse bidimensionnelle (2DE) ou d'autres approches protéomiques. La chromatographie sur héparine est une puissante technologie de prétraitement d'échantillons qui a été largement utilisée pour fractionner des protéines à partir d'extraits d'organismes procaryotes ou de cellules eucaryotes. A titre d'exemple, le fractionnement des facteurs de croissance des fibroblastes (FGF) à partir de l'extrait de cellules endothéliales microvasculaires de cerveau de souris (MVEC) est maintenant introduit pour démontrer le procédé de chromatographie sur héparine.