Bibliotheksvorbereitung ist ein kritischer Schritt, der die Umwandlung von Nukleinsäuren in ein für die Sequenzierung geeignetes Format umfasst. Dieser Prozess ist entscheidend, um hochwertige Sequenzierungsdaten zu erhalten, und kann die Genauigkeit und Zuverlässigkeit der nachgelagerten Analysen erheblich beeinflussen.

Die Bibliotheksvorbereitung umfasst typischerweise mehrere wichtige Schritte: Fragmentierung der Nukleinsäuren, Endreparatur, Adapterligatur und Amplifikation (Abbildung 1). Diese Schritte ermöglichen die Erstellung einer Bibliothek, die mit verschiedenen NGS-Plattformen sequenziert werden kann. Die Wahl der Methode zur Bibliotheksvorbereitung kann je nach Art der zu analysierenden Nukleinsäure (DNA oder RNA), der Menge und Qualität des Ausgangsmaterials und den spezifischen Anforderungen des Sequenzierungsprojekts variieren.

Abbildung 1: DNA-Bibliotheksvorbereitung.

Neueste Fortschritte

Neueste Studien haben innovative Strategien hervorgehoben, um die Effizienz und Qualität der Bibliotheksvorbereitung zu verbessern:

• Zielgerichtete Sequenzierung: Eine neuartige Methode, bei der genomische DNA zirkularisiert wird, ermöglicht eine zielgerichtete Sequenzierung mit weniger Schritten und reduzierten PCR-Amplifikationsanforderungen. Dieser Ansatz vereinfacht die Bibliotheksvorbereitung, indem Fang-Oligonukleotide direkt in die zirkularisierte DNA integriert werden, was eine effiziente Zielgerichtetheit ohne umfangreiche Amplifikation ermöglicht.
• Hochdiverse Bibliotheken: Fortschritte in der viralen Vektor-Barcoding-Technologie haben die Erstellung hochdiverser Plasmidbibliotheken ermöglicht, die die genetische Funktion in vivo bewerten können. Mit dieser Methode können Millionen von einzigartig barcodeplasierten Plasmiden in einer einzigen Reaktion erzeugt werden, was den Durchsatz und die Anwendungsvielfalt in der funktionellen Genomik erheblich steigert.
• Verbesserungen der Qualitätskontrolle: Verbesserte Qualitätskontrollmaßnahmen während der Bibliotheksvorbereitung wurden entwickelt, um eine hohe Genauigkeit der Sequenzierungsergebnisse sicherzustellen. Beispielsweise ermöglicht der Einsatz von Bioanalyzer-Systemen eine genaue Bewertung der Bibliotheksqualität vor der Sequenzierung, sodass nur hochwertige Bibliotheken verarbeitet werden.

Um Ihre Forschungsbedürfnisse zu unterstützen, bieten wir eine umfassende Palette von Produkten zur Bibliotheksvorbereitung an, die effiziente und zuverlässige Arbeitsabläufe fördern. Unsere Produkte sind für verschiedene Anwendungen optimiert, sodass Sie Zugang zu hochwertigen Reagenzien und Werkzeugen haben, die auf Ihre spezifischen Anforderungen zugeschnitten sind. Entdecken Sie noch heute unser Angebot, um Ihre Bibliotheksvorbereitungsprozesse zu verbessern!