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Chromatographie-Harze
Das Prinzip der Chromatographie beruht auf zwei Phasen: der mobilen Phase, die die Probe bewegt, und der stationären Phase, die ihre Reinigung ermöglicht. Die Chromatographieharze bilden diese stationäre Phase.
Je nach Art des verwendeten Harzes gibt es verschiedene Arten der Chromatografie. Zu den vier Hauptarten der Chromatographie gehören die Affinitätschromatographie, die Ionenaustauschchromatographie (IEX), die hydrophobe Interaktionschromatographie (HIC) und die Größenausschlusschromatographie (SEC). Die meisten Reinigungssysteme erfordern den Einsatz mehrerer dieser Arten von Chromatographieverfahren, um die für nachgeschaltete Anwendungen erforderliche Reinheit zu erreichen. Die Wahl der am besten geeigneten chromatographischen Methode(n) und die Reihenfolge dieser Methoden ist für die Optimierung einer Proteinreinigungsmethode von entscheidender Bedeutung.
Art der Chromatographie | Trennungsprinzip | Interaktion | Elution |
Affinität | Spezifische Interaktion | Kein konkurrierender Ligand | Kompetitiver Ligand (spezifisch), Abbau von Protein/Protein-Wechselwirkungen durch Änderung der Bedingungen (unspezifisch) |
Ionenaustausch | Netto-Oberflächenladung | Niedrige Ionenstärke | Hohe Ionenstärke, steigend (Kationen) oder fallend (Anionen) pH-Wert |
Hydrophobe Wechselwirkungen | Hydrophobicity | Hohe Ionenstärke | Niedrige Ionenstärke |
Größenausschluss | Hydrodynamischer Radius |