Der NAD⁺-Kinase-Aktivitätsassay ist eine entscheidende biochemische Technik, die verwendet wird, um die Aktivität der NAD⁺-Kinase zu messen, einem Enzym, das NAD⁺ phosphoryliert, um NADP⁺ zu erzeugen. Diese Umwandlung ist entscheidend für die Aufrechterhaltung des Gleichgewichts des NAD/NADP⁺-Pools, der eine wichtige Rolle in verschiedenen Stoffwechselprozessen spielt, einschließlich der Zellatmung, Lipidsynthese und der Regulation von oxidativem Stress.

Der Assay umfasst in der Regel das Inkubieren einer Reaktionsmischung, die NAD⁺, ATP und die Enzymquelle unter kontrollierten Bedingungen enthält. Nach der Inkubation wird die Reaktion gestoppt, und das resultierende NADP⁺ kann mithilfe spektrophotometrischer Methoden oder Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) quantifiziert werden. Ein gängiger Ansatz für diesen Assay ist, die Reaktion mit Glukose-6-phosphat-Dehydrogenase (G6PDH) zu koppeln, wobei die Produktion von NADP⁺ zur Reduktion von NAD⁺ zu NADH führt.

Dieser Assay ist besonders wertvoll in der Forschung zur Stoffwechselregulation, Krebsbiologie und der Untersuchung der Auswirkungen verschiedener Verbindungen auf den zellulären Stoffwechsel. Darüber hinaus hat das Verständnis der NAD⁺-Kinase-Aktivität Implikationen für therapeutische Strategien, die auf Stoffwechselstörungen und altersbedingte Krankheiten abzielen, wodurch es zu einem wichtigen Werkzeug in der Grundlagen- und angewandten Forschung wird.