Laktatdehydrogenase (LDH)
Der Zelltod oder die Zytotoxizität wird in der Regel durch die Quantifizierung von Plasmamembranläsionen bewertet. Die LDH-Zytotoxizitätsassay-Kits bieten eine schnelle und einfache Methode zur Quantifizierung der Zytotoxizität, die auf der Messung der Aktivität der von geschädigten Zellen freigesetzten Laktatdehydrogenase (LDH) beruht.
Im Gegensatz zu vielen anderen zytoplasmatischen Enzymen, die in vielen Zellen entweder in geringen Mengen (z. B. alkalische und saure Phosphatase) oder instabil vorhanden sind, ist LDH ein stabiles zytoplasmatisches Enzym, das in allen Zellen vorhanden ist und nach einer Schädigung der Plasmamembran schnell in den Zellkulturüberstand freigesetzt wird. Die LDH-Aktivität kann durch eine gekoppelte Enzymreaktion bestimmt werden: LDH oxidiert das Laktat zu Pyruvat, das dann mit dem Tetrazoliumsalz INT zu Formazanat reagiert. Die Zunahme der im Kulturüberstand gebildeten Formazanmenge steht in direktem Zusammenhang mit der Zunahme der Zahl der lysierten Zellen. Der Formazan-Farbstoff ist wasserlöslich und kann spektrophotometrisch bei 500 nm nachgewiesen werden.
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RUOCE / IVD
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