IHC-Detektionskits auf Polymerbasis - Humanes Gewebe - Anti-Human-IgG - Meerrettichperoxidase (HRP)
Polymerbasierte IHC-Nachweissysteme bestehen aus einem Polymer eines aktiven Enzyms, das an einen sekundären Antikörper gebunden ist, der für einen primären Zielantikörper spezifisch ist. Dieses Format ermöglicht eine erhebliche Steigerung der Enzymmenge an der Lokalisierungsstelle und damit ein höheres Signal, da mehr Substrat in ein Präzipitat umgewandelt wird. Außerdem ermöglicht dieses System ein Ein-Schritt-Protokoll anstelle der zwei Schritte des ABC-Systems (biotinylierter Antikörper + Avidin-Enzym-Komplex).
Der Nachweis des Antigens mit dem primären Antikörper der gleichen Spezies wie das zu testende Gewebe führt bei der indirekten Nachweismethode zu einem hohen Hintergrund. Dies schränkt die Verwendung von Screening-Antikörpern auf menschlichem Gewebe stark ein. Unsere Kits sind für die Färbung humaner Primärantikörper auf menschlichem Gewebe ohne Hintergrundfärbung konzipiert. Das NeoKlear Human HRP-Polymer Detection Kit enthält spezielle Blockierungspuffer, HRP-gebundene polymere Sekundärantikörper und humane Primer in einem gebrauchsfertigen System. Diese Technologie erfordert eine Vorinkubation mit dem Primärantikörper über Nacht, was zu einer ausgezeichneten Empfindlichkeit und hohen Spezifität führt. Es handelt sich um ein biotinfreies System, so dass die unspezifische Färbung, die durch das Streptavidin/Biotin-System aufgrund von endogenem Biotin verursacht wird, überwunden werden kann.
Die am häufigsten verwendeten alkalischen Phosphatasesubstrate sind Fast Red und Permanent Red. Diese beiden Substrate bilden wasserunlösliche rote Präzipitate, wenn sie durch alkalische Phosphatase (AP) hydrolysiert werden. Aus diesem Grund werden sie auch als Chromogene bezeichnet. Die Lokalisierung der Zielproteine erfolgt durch mikroskopische Visualisierung der Präzipitate im Gewebe.
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