Der Neutralrot-Zytotoxizitätstest ist eine der am häufigsten verwendeten Methoden zum Nachweis der Lebensfähigkeit von Zellen oder der Zytotoxizität von Arzneimitteln. Das Prinzip dieses Tests beruht auf dem Nachweis lebensfähiger Zellen durch die Absorption des Farbstoffs Neutralrot. Neutralrot ist ein Eurhodin-Farbstoff, der Lysosomen in lebensfähigen Zellen anfärbt. Lebensfähige Zellen können Neutralrot durch aktiven Transport aufnehmen und den Farbstoff in ihre Lysosomen einbauen, während nicht lebensfähige Zellen diesen Chromophor nicht aufnehmen können. Daher können die lebensfähigen Zellen nach dem Waschen den aufgenommenen Farbstoff unter angesäuerten Extraktionsbedingungen freisetzen.
Die Menge des freigesetzten Farbstoffs kann zur Bestimmung der Gesamtzahl der lebensfähigen Zellen oder der Zytotoxizität des Arzneimittels verwendet werden. Der Neutralrot-Absorptionstest liefert ein quantitatives Maß für die Anzahl der lebensfähigen Zellen und kann bei einer OD von 540 nm gemessen werden.