Visualisieren Sie Apoptose in Echtzeit mit NucView
Die EINZIGEN Caspase-Substrate für den Apoptose-Nachweis in Echtzeit
Die NucView Caspase-3-Substrate bieten eine validierte Lösung für die Echtzeitüberwachung der Apoptose in lebenden Zellen durch Mikroskopie oder Durchflusszytometrie.
- Einfach: Kein Waschen, homogener Assay für Echtzeit- oder Endpunkt-Apoptose-Nachweis in lebenden Zellen
- Schnell und fixierbar: Mit Formaldehyd fixierbare Färbung in nur 15 Minuten
- Ungiftig: Nützlich für lange, mehrtägige Experimente
- 3 Farboptionen: blaue, grüne oder rote Fluoreszenz
Erhältlich im 10 µL Format, testen Sie es!
Wie funktioniert es?
Wenn das NucView-Substrat in Zellen eingebracht wird, ist es zunächst nicht fluoreszierend und kann die Plasmamembran durchdringen und in das Zytoplasma eindringen. Während der Apoptose spaltet Caspase-3/7 das Substrat und setzt den hochaffinen DNA-Farbstoff frei, der zu einer Fluoreszenzfärbung des Zellkerns führt.
Über NucView®
NucView®-Substrate bestehen aus einem fluorogenen DNA-Farbstoff, der an die Erkennungssequenz der Caspase-3/7 DEVD gekoppelt ist. Das zunächst nicht fluoreszierende Substrat durchdringt die Plasmamembran und gelangt in das Zytoplasma. In apoptotischen Zellen spaltet Caspase-3/7 das Substrat und setzt den hochaffinen DNA-Farbstoff frei, der in den Zellkern wandert und die DNA mit Fluoreszenz färbt. Somit sind die NucView-Caspase-3-Substrate bifunktional und ermöglichen den Nachweis der Caspase-3/7-Aktivität und die Visualisierung der morphologischen Veränderungen im Zellkern während der Apoptose.
Im Gegensatz zu anderen fluorogenen Caspase-Substraten oder auf fluoreszierenden Caspase-Inhibitoren (FLICA) basierenden Assays können die NucView® Caspase-3-Substrate zum Nachweis der Caspase-3/7-Aktivität in einzelnen intakten Zellen verwendet werden, ohne die Apoptose-Progression zu hemmen. Die Färbung ist mit der anschließenden Fixierung und Permeabilisierung für die Immunfärbung kompatibel.
NucView®-Substrate werden als Lösungen in DMSO oder phosphatgepufferter Kochsalzlösung (PBS) angeboten. Die Substrate in PBS sind für die Verwendung in Zellen formuliert, die empfindlich auf DMSO-Toxizität reagieren. Bei nicht DMSO-empfindlichen Zelltypen kann die Zugabe von DMSO während der Substratinkubation die NucView®-Färbung verstärken.