Canvax Biotech
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Canvax is a leading manufacturer and supplier of the most innovative solutions, kits and R&D Reagents inside Molecular Biology fields. Since its foundation in 2001, Canvax offers reliable, cost-effective and easy-to-use innovative tools for research. Based in Córdoba (Spain), since its beginning it has focused on R&D of multiplex high throughput platforms (HTS) for Drug discovery and Diagnostic applied biosensors. Over a decade later, Canvax is a worldwide leading expert in GPCR expression in heterologous cells, with important patents and exclusive know-how. Canvax prides itself to be the first company to get an unprecedented milestone that could revolutionize the Diagnostics sector: Canvax established stable high-level expression of odour GPCRs into heterologous cell lines in 2014. This key milestone, that could be applied in diagnostic, perfume and cosmetic industry, are being employed to obtain a molecular nose, a sensitive and non-invasive diagnostic molecular device for early detection of cancer, as the nose of trained dogs do. Thanks to this project, Canvax was awarded, in 2013, with the largest Public & Private Contract for Pre competitive Technology Development in Spanish history. Website : www.lifescience.canvaxbiotech.com | ||
Reporter-basierte Assays
Reporter-basierte Assays sind biologische Assays zur Messung der Regulationsfähigkeit einer unbekannten DNA-Sequenz, zur Untersuchung der Genregulation durch cis- oder trans-wirkende Faktoren oder zur Messung der Aktivierung von Zellsignalwegen.
Bei diesen Assays wird die unbekannte Promotorsequenz mit einem leicht nachweisbaren Reportergen verknüpft, dessen Produkt leicht nachgewiesen und quantitativ gemessen werden kann. Das Expressionsniveau des Reportergens wird durch die Quantifizierung der enzymatischen Aktivität des Reporterproteins überwacht, das zur Charakterisierung von regulatorischen Sequenzen, der Aktivität von Transkriptionsfaktoren, der Zellsignalisierung oder von Signalwegen verwendet wird.
Zu den gängigen Reportergenen gehören Beta-Galaktosidase, Luziferase, Beta-Lactamase, alkalische Phosphatase und GFP (grünes Fluoreszenzprotein).
Mit Hilfe von Luziferasen werden biolumineszente Reporter-Assays erstellt, die hoch quantitativ und über einen breiten dynamischen Bereich empfindlich sind und sich durch Messung der Lichtleistung leicht nachweisen lassen.
Die meisten Reportergen-Assays umfassen entweder ein oder zwei Reportergene, wobei das zweite Reportergen von einem "Kontroll"-Vektor exprimiert wird, um die Ergebnisse des experimentellen Reporters zu normalisieren.
Das Kontrollreportergen wird in der Regel durch einen konstitutiven Promotor angetrieben, und der Kontrollvektor wird mit dem experimentellen Reporter kotransfiziert.
Die Zellen werden verschiedenen Faktoren oder Bedingungen ausgesetzt, deren Wirkung durch Messung der Veränderungen der Lichtemission leicht verfolgt werden kann. Zur Messung des exprimierten Reportergenproteins werden verschiedene Nachweisverfahren wie Lumineszenz, Absorption und Fluoreszenz verwendet.
Reporterassays können auch zur quantitativen Bewertung der RNAi-Aktivität und zur Identifizierung von Modulatoren von RNAi verwendet werden. Sie können auch zum Screening von Chemikalien verwendet werden, die die Androgen-Signalübertragung stören.
Die Reporterzellen verwenden eine transiente Transfektion, um zuverlässige und genaue Ergebnisse zu gewährleisten, und die Zellen sind so optimiert, dass sie mit den in den Kits enthaltenen Reagenzien die besten Versuchsbedingungen bieten, was eine einfache Standardisierung der Experimente ermöglicht.
Reporterzellen-basierte Assay-Kits bieten eine optimale Assay-Empfindlichkeit und einen dynamischen Bereich bei der Quantifizierung der Rezeptoraktivität, was sie zu einem zuverlässigen und kostengünstigen Screening-Service für pharmazeutische Verbindungen, Chemikalien oder Umweltproben macht.
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