Cell Biology
1. Einführung :
Die Leberfibrose ist eine chronische Erkrankung, die durch eine fortschreitende Vernarbung des Lebergewebes aufgrund einer anhaltenden Leberschädigung gekennzeichnet ist. Die übermäßige Anhäufung von extrazellulärer Matrix (ECM) in der Leber kann durch verschiedene Faktoren verursacht werden, z. B. durch Virusinfektionen, Alkoholkonsum, durch Stoffwechselstörungen bedingte Lebererkrankungen, cholestatische Lebererkrankungen und Autoimmunhepatitis.
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2D- vs. 3D-Zellkultur
Die Vorteile der 3D-Zellkultur gegenüber der herkömmlichen 2D-Zellkultur sind in der wissenschaftlichen Gemeinschaft weithin anerkannt.
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In dieser Arbeit wurde ein Plasmidproduktionsprozess durchgeführt, bei dem herkömmliche Erlenmeyerkolben mit LB-Medium und das Ultra Yield®-System von Thomson verglichen wurden. E. coli-Zellen wurden in beiden Systemen in einem Orbitalschüttler (Multitron, INFORS HT) kultiviert, das Bakterienwachstum wurde überwacht und die Plasmide wurden am Ende der Kultivierung gereinigt. Anschließend wurde die Qualität der isolierten Plasmide mittels HPLC analysiert. Die Kombination der Ultra Yield®-Flaschen mit dem angereicherten Plasmid+®-Medium und der verbesserten AirOtop®-Dichtung führte zu höheren Zelldichten und einer 21-fach höheren Plasmidmenge als in Erlenmeyer-Schüttelkolben mit LB-Medium.
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New User Protocol
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Removing adherently grown cells from a µ-Channel after cultivation
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Experimental setup optimization of wound healing assays and cell migration assays
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Détails de la formule :
• La vitesse de fermeture de la plaie est le taux auquel la surface couverte par les cellules augmente avec le temps, généralement obtenue à partir de la pente de la droite de tendance dans la phase linéaire (voir Chapitre 1, par exemple, 613 µm²/min).
• La longueur du front cellulaire est la hauteur ou la longueur de l'image, selon l'orientation de l'écart (par exemple, 686,67 μm).
• N (égal à 1 ou 2) est le nombre de fronts cellulaires migratoires impliqués dans la fermeture de l'écart. Pour les essais avec deux fronts cellulaires convergents, ce qui est le cas lors de l'utilisation de l'ibidi CultureInsert 2 Well, N serait 2.
Calcul d'exemple :
Les vitesses normalisées des fronts cellulaires permettent des comparaisons entre les expériences. Un minimum de trois réplicats biologiques par condition de traitement est recommandé pour assurer une significativité statistique. Ces réplicats doivent être regroupés en valeurs moyennes, accompagnées d'estimations d'erreur telles que l'écart type ou l'erreur standard. Les données collectives sont mieux visualisées à l'aide de boîtes à moustaches, qui fournissent une représentation complète de la distribution des données, incluant la médiane, les quartiles et les valeurs aberrantes potentielles. Après la présentation des données, une analyse statistique rigoureuse est essentielle. Par exemple, une ANOVA peut être appliquée pour déterminer la signification des différences entre les groupes de traitement, avec des tests post hoc ultérieurs ou leurs équivalents non paramétriques pour les ensembles de données qui s'écartent de la distribution normale. De telles analyses statistiques sont essentielles pour valider la fiabilité des conclusions tirées des tests de cicatrisation des plaies.