El ensayo de actividad de NAD⁺ quinasa es una técnica bioquímica fundamental utilizada para medir la actividad de la NAD⁺ quinasa, una enzima responsable de fosforilar NAD⁺ para producir NADP⁺. Esta conversión es crucial para mantener el equilibrio del pool NAD/NADP⁺, que juega un papel significativo en varios procesos metabólicos, incluyendo la respiración celular, la síntesis de lípidos y la regulación del estrés oxidativo.

El ensayo generalmente implica la incubación de una mezcla de reacción que contiene NAD⁺, ATP y la fuente de enzima bajo condiciones controladas. Tras la incubación, la reacción se detiene y el NADP⁺ resultante se puede cuantificar utilizando métodos espectrofotométricos o cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). Un enfoque común para este ensayo es acoplar la reacción con glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6PDH), donde la producción de NADP⁺ lleva a la reducción de NAD⁺ a NADH.

Este ensayo es especialmente valioso en la investigación centrada en la regulación metabólica, la biología del cáncer y el estudio de los efectos de varios compuestos en el metabolismo celular. Además, comprender la actividad de la NAD⁺ quinasa tiene implicaciones para estrategias terapéuticas que apuntan a trastornos metabólicos y enfermedades relacionadas con la edad, lo que lo convierte en una herramienta esencial tanto en la investigación básica como aplicada.