Anticuerpos fragmentados
Los anticuerpos secundarios son anticuerpos que se unen a anticuerpos primarios o fragmentos de anticuerpos.
Los anticuerpos secundarios fragmentados son anticuerpos que han sido digeridos enzimáticamente para eliminar la región Fc del anticuerpo, dejando sólo los fragmentos Fab o F(ab')2 de unión al antígeno.
Estos fragmentos son monovalentes o divalentes, respectivamente, y pueden utilizarse para bloquear inmunoglobulinas endógenas en células, tejidos u otras superficies, y para bloquear las inmunoglobulinas expuestas en experimentos de marcaje múltiple utilizando anticuerpos primarios de la misma especie. También pueden utilizarse para marcar anticuerpos primarios antes de la incubación con la muestra experimental. Las ventajas de utilizar anticuerpos secundarios fragmentados incluyen la eliminación de la unión no específica entre las porciones Fc de los anticuerpos y los receptores Fc de las células, facilitando una mejor penetración del antígeno en el tejido y reduciendo el fondo de la unión del anticuerpo primario en experimentos de doble tinción.
Las ventajas de utilizar anticuerpos secundarios de fragmentos Fab incluyen:
- Eliminar la unión inespecífica entre las porciones Fc de los anticuerpos y los receptores Fc de las células, lo que es especialmente importante cuando se trabaja con células vivas.
- Facilitar una mejor penetración del antígeno en el tejido, lo que es importante para los experimentos de inmunohistoquímica (IHC).
- Reducir el fondo de la unión del anticuerpo primario en experimentos de doble tinción.
- Permitir la conjugación directa con etiquetas detectables a través de sus grupos sulfhidrilo, garantizando que el sitio de unión activo del anticuerpo no se vea afectado.
