Anoikis (muerte celular dependiente del anclaje)
La adhesión a la matriz extracelular (ECM) es esencial para la supervivencia y propagación de muchas células adherentes. La apoptosis que resulta de la pérdida de la adhesión celular a la ECM, o adhesión inapropiada, se define como“anoikis”. Anoikis, derivado de la palabra griega para falta de hogar, está involucrada en los procesos fisiológicos de renovación tisular y homeostasis celular.
Una característica común en el desarrollo y crecimiento del carcinoma es la capacidad de las células transformadas de sobrevivir bajo condiciones de crecimiento "independiente de anclaje" o "esferoidales". Se ha demostrado que esta resistencia al anoikis está involucrada en la pérdida de la homeostasis celular, el crecimiento tumoral y la metástasis. La inhibición de la adhesión celular, expansión y crecimiento sobre la ECM es un impedimento para el proceso de curación celular, lo que la convierte en un posible objetivo terapéutico. Prevenir el anoikis y mejorar la adhesión y expansión celular es un objetivo importante en el desarrollo de técnicas de trasplante celular, incluida la utilización terapéutica de células progenitoras. Más estudios dirigidos a controlar los mecanismos moleculares de la resistencia al anoikis servirán para definir terapias efectivas para el tratamiento de muchas malignidades humanas.
Principio del ensayo
Las células se cultivan en placas recubiertas con Poly-Hema o en placas de control. La viabilidad celular se determina mediante MTT o Calcein AM. La muerte celular inducida por anoikis se mide mediante Ethidium Homodimer (EthD-1). EthD-1 es un excelente marcador para medir células muertas. EthD-1 es un colorante fluorescente rojo que solo puede penetrar en membranas celulares dañadas. EthD-1 fluoresce con una amplificación de 40 veces al unirse a ssDNA, dsDNA, RNA, oligonucleótidos y ADN triplex. Los niveles de fluorescencia de fondo son muy bajos porque los colorantes son prácticamente no fluorescentes antes de interactuar con las células.
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- kit 6
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- FC 1
- WB 1
- 23GB3015 1
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