Secuenciación de proteínas de anticuerpos
Conocer la secuencia de su anticuerpo monoclonal no sólo es el primer paso hacia la ingeniería del anticuerpo y la optimización de su función, sino que también es fundamental para la solicitud de patentes.
Tú provees:
Muestra de anticuerpo monoclonal (>0,2mg, >95%puro)
Entregamos:
- Secuencia completa de las cadenas pesada y ligera
- Cobertura completa de la secuencia mediante LC-MS/MS
- Informe exhaustivo
- Datos LC-MS/MS sin procesar
Principales ventajas
- La capacidad de reconstruir el hibridoma a partir de la muestra de anticuerpo monoclonal
- Determinar con precisión las regiones CDR
- Análisis exhaustivos para confirmar su producto de anticuerpo, incluyendo secuencia primaria, PTMs, glicosilación y varianza de secuencia.
Resumen del servicio
Ofrecemos un servicio de secuenciación de novo de anticuerpos. Secuenciamos directamente la proteína del anticuerpo mediante digestión enzimática múltiple y LC-MS/MS de alta resolución. Nuestro servicio garantiza la secuenciación completa de las cadenas pesadas y ligeras.
Our sequencing process does not require hybridoma, mRNA, or other sequence information. It provides a direct and independent insight into your antibody sample.Nuestro proceso de secuenciación no requiere información sobre hibridomas, ARNm u otras secuencias. Proporciona una visión directa e independiente de su muestra de anticuerpos.
Preciso– Garantizamos al menos 5 veces la cobertura de las CDR en las regiones variables. Cada aminoácido de las CDR está respaldado por iones de fragmento en al menos cinco exploraciones MS2. Para Leu e Ile isoméricas, nos esforzamos por hacer una inferencia correcta a partir de la especificidad enzimática y las estadísticas de la base de datos de anticuerpos.
Completo – Como opción, ofrecemos la caracterización completa de la proteína del anticuerpo. Nuestro servicio incluye el análisis de PTMs, glicosilación, puentes disulfuro, contaminantes y otros aspectos personalizados según sus necesidades.
Eficaz – Utilizamos una cantidad mínima de muestra de anticuerpos (0,2 mg) y entregamos los resultados en un plazo de 15 días laborables con una calidad constante.
Método
Nuestro procedimiento estándar consta de los siguientes pasos.
- Digerir la proteína del anticuerpo en péptidos superpuestos con múltiples enzimas.
- Analizar las digestiones con LC-MS/MS utilizando un espectrómetro de masas Thermo Orbitrap.
- Caracterización de los péptidos solapados mediante secuenciación peptídica de novo.
- Ensamblaje automatizado de secuencias de anticuerpos a partir de péptidos caracterizados.
- Examen y anotación de los resultados por nuestros científicos.
