Citofluorimetria

Citofluorimetria è una tecnica analitica potente e versatile che consente ai ricercatori di misurare e analizzare le caratteristiche fisiche e chimiche di singole cellule o particelle mentre scorrono in un flusso di liquido. Questo metodo è particolarmente utile in campi come l'immunologia, l'ematologia e la biologia cellulare, poiché fornisce dati rapidi e quantitativi su popolazioni cellulari complesse.

Il processo inizia con la preparazione del campione, in cui le cellule vengono trattate con coloranti fluorescenti che si legano a componenti cellulari specifici, come proteine o acidi nucleici. Questi coloranti emettono luce a diverse lunghezze d'onda quando vengono eccitati da un laser. Il campione preparato viene quindi introdotto nel citometro a flusso, dove il sistema di fluidica assicura che le cellule siano allineate in una singola fila mentre attraversano il fascio del laser. Questa messa a fuoco idrodinamica è cruciale per misurazioni accurate (Figura 1).

Figura 1: Schema di un comune citometro a flusso

Quando ogni cellula incrocia il laser, disperde luce e emette fluorescenza. I rivelatori catturano questa luce emessa, permettendo l'analisi simultanea di molteplici parametri. I dati raccolti possono essere visualizzati in vari formati, come istogrammi o grafici a dispersione, che rappresentano la distribuzione di diversi tipi di cellule in base alle loro caratteristiche.