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Trattamento dei tessuti
Per rendere visibile ciò che vogliamo osservare, è necessario mettere in atto varie tecniche che applichiamo al materiale, questo si chiama preparazione dei campioni. Per l'osservazione in microscopia ottica o elettronica, le sezioni di tessuto esaminate sono il risultato di procedure tecniche che richiedono diverse fasi successive: fissazione, inclusione, taglio, colorazione, montaggio.
La preparazione dei campioni istologici può variare notevolmente in base alle proprietà intrinseche dei campioni, come le dimensioni, ma anche in base agli obiettivi dell'esame (diagnosi istopatologica nell'uomo o negli animali o protocollo di ricerca) e alle procedure a valle di questa preparazione.
Lo scopo della fissazione è quello di preservare le strutture. Infatti, il prelievo dei tessuti ne provoca la morte: le cellule scaricano i loro enzimi, provocando un'autoregolazione del tessuto. Inoltre, nell'aria ambiente, i campioni possono essere contaminati da batteri.
Lo scopo dell'inclusione è quello di consentire tagli fini e regolari. Il mezzo di inclusione più utilizzato è la paraffina, ma vengono impiegati altri mezzi a seconda della modalità di conservazione dei tessuti e delle tecniche utilizzate.
Le sezioni del blocco di paraffina sono realizzate con un microtomo che consente di ottenere fette sufficientemente fini da poter essere osservate al microscopio. Lo spessore delle sezioni dipende dalla tecnica microscopica utilizzata.
Le colorazioni effettuate su vetrini, accentuano i contrasti per riconoscere meglio i diversi elementi del preparato.
Infine, il montaggio è l'ultima fase prima dell'osservazione.