Le tampon de fixation pour cytométrie en flux (FCM) (10X) est un réactif essentiel utilisé dans la recherche en immunologie et en biologie cellulaire, en particulier dans les applications de cytométrie en flux. Ce tampon spécialisé est méticuleusement formulé pour préserver les structures cellulaires et les épitopes antigéniques, permettant ainsi une analyse précise et fiable des populations cellulaires. La composition du tampon de fixation FCM (10X) comprend généralement du paraformaldéhyde (PFA) comme principal agent fixateur, ainsi que d'autres composants tels que le tampon phosphate de sodium et le saccharose. Le PFA réagit avec les protéines cellulaires, formant des liaisons croisées qui immobilisent les structures cellulaires et empêchent la dégradation ou l'altération des épitopes antigéniques. Le tampon phosphate de sodium maintient la stabilité du pH de la solution, garantissant des conditions de fixation optimales, tandis que le saccharose contribue à maintenir l'osmolarité cellulaire et à minimiser le rétrécissement ou le gonflement des cellules pendant la fixation. Dans les expériences de cytométrie de flux, le tampon de fixation FCM (10X) est utilisé pour arrêter les processus cellulaires et préserver la morphologie des cellules et les profils d'expression des protéines. Les cellules sont d'abord traitées avec le tampon, qui pénètre rapidement la membrane cellulaire et réticule les protéines intracellulaires au contact. Cette étape de fixation immobilise efficacement les composants cellulaires, y compris les antigènes, à l'intérieur de la cellule, en préservant leur distribution spatiale et leur abondance relative. Les chercheurs utilisent le tampon de fixation FCM (10X) dans diverses applications de cytométrie en flux, notamment l'immunophénotypage, l'analyse du cycle cellulaire et la coloration intracellulaire. Après fixation, les cellules peuvent être perméabilisées pour permettre l'accès des anticorps ou des colorants fluorescents aux cibles intracellulaires, ce qui permet une analyse multiparamétrique de l'expression des protéines et des fonctions cellulaires. L'optimisation des conditions de fixation, y compris la concentration du tampon, le temps de fixation et la température, est essentielle pour obtenir des résultats optimaux dans les expériences de cytométrie de flux. Une mauvaise fixation peut entraîner une agglutination des cellules, une perte d'antigénicité ou une liaison non spécifique des anticorps, ce qui nuit à la qualité et à l'interprétation des données.