Preparazione del tessuto
Per rendere visibile ciò che vogliamo osservare, è necessario mettere in atto varie tecniche che vengono applicate al materiale, questa è chiamata preparazione dei campioni. Per l'osservazione al microscopio ottico o elettronico, le sezioni di tessuto esaminate sono il risultato di procedure tecniche che richiedono diverse fasi successive: fissazione, inclusione, sezionamento, colorazione, montaggio.
La preparazione dei campioni istologici può variare notevolmente a seconda delle proprietà intrinseche dei campioni, come le dimensioni, ma anche degli obiettivi dell'esame (diagnosi istopatologica nell'uomo o negli animali, o protocollo di ricerca) e delle procedure previste a valle di questa preparazione.
Lo scopo della fissazione è quello di preservare le strutture. Infatti, la rimozione dei tessuti ne provoca la morte: le cellule rilasciano i loro enzimi, provocando un'autodigestione del tessuto. Inoltre, nell'aria ambiente, i campioni possono essere contaminati da batteri.
Lo scopo dell'inclusione è quello di consentire la produzione di sezioni sottili e regolari. Il mezzo di inclusione più comunemente usato è la paraffina, ma vengono utilizzati altri mezzi a seconda del metodo di conservazione dei tessuti e delle tecniche utilizzate.
Le sezioni del blocco di paraffina vengono realizzate con un microtomo per produrre fette sezionali (sezioni) abbastanza sottili da poter essere osservate al microscopio. Lo spessore delle sezioni dipende dalla tecnica microscopica utilizzata.
La colorazione sui vetrini accentua i contrasti per riconoscere meglio i diversi elementi del preparato.
Infine, il montaggio è l'ultima fase prima dell'osservazione.
