Camera Boyden
La camera di Boyden è uno strumento utile per studiare la migrazione e l'invasione cellulare. Consiste in un inserto cilindrico per colture cellulari annidato all'interno del pozzetto di una piastra di coltura cellulare. L'inserto contiene una membrana di policarbonato sul fondo con una dimensione dei pori definita.
Le cellule vengono seminate nella parte superiore dell'inserto in terreni privi di siero, mentre nel pozzetto sottostante vengono collocati siero o chemoattrattanti simili. Le cellule migratorie si muovono attraverso i pori verso il chemioattrattore sottostante e possono essere colorate o quantificate in un lettore di piastre. Le cellule invasive possono essere misurate in modo simile posizionando un rivestimento di proteine della matrice extracellulare sopra la membrana.
I test alla camera di Boyden possono essere utilizzati per misurare l'invasione cellulare e vari tipi di migrazione cellulare:
Le cellule vengono seminate nella parte superiore dell'inserto in terreni privi di siero, mentre nel pozzetto sottostante vengono collocati siero o chemoattrattanti simili. Le cellule migratorie si muovono attraverso i pori verso il chemioattrattore sottostante e possono essere colorate o quantificate in un lettore di piastre. Le cellule invasive possono essere misurate in modo simile posizionando un rivestimento di proteine della matrice extracellulare sopra la membrana.
I test alla camera di Boyden possono essere utilizzati per misurare l'invasione cellulare e vari tipi di migrazione cellulare:
- La chemiotassi descrive la migrazione delle cellule in base alle sostanze chimiche presenti nell'ambiente circostante. La chemiotassi cellulare può indicare la migrazione verso o lontano da un particolare segnale chimico.
- L'aptotassi è definita come la migrazione delle cellule lungo un gradiente di chemioattrattori legati alla matrice extracellulare. In questi saggi, l'inserto della camera di Boyden è rivestito sul lato inferiore con proteine di collagene I o fibronectina.
- La trasmigrazione descrive la migrazione di cellule (solitamente leucociti o cellule tumorali) attraverso l'endotelio vascolare verso un chemioattrattore.
Tipo di test
Tipi di cellule
Dimensione dei pori
Rivestimento
Formati
Chemiotassi
Leucociti
3 µm
Nessuno
24 pozzetti
Neutrofili
96 pozzetti
Linfociti
5 µm
Nessuno
24 pozzetti
Macrofagi
96 pozzetti
Monociti
Cellule endoteliali
8 µm
Nessuno
24 pozzetti
Cellule epiteliali
96 pozzetti
Fibroblasti
Cellule tumorali
Astrociti
12 µm
Nessuno
24 pozzetti
Cellule a lento movimento
Aptassi
Cellule endoteliali
8 µm
Collagene I (fondo)
24 pozzetti
Cellule epiteliali
Fibroblasti
Fibronectina (fondo)
24 pozzetti
Trasmigrazione
Leucociti
3 µm
Nessuno
24 pozzetti
Cellule tumorali
8 µm
Nessuno
24 pozzetti
Invasione
Cellule endoteliali
Cellule epiteliali
Cellule epiteliali
8 µm
Matrice extracellulare (parte superiore)
24 pozzetti
96 pozzetti
96 pozzetti
Fibroblasti
Cellule tumorali
Cellule tumorali
Collagene I (in alto)
24 pozzetti
96 pozzetti
96 pozzetti
Laminina I (in alto)
24 pozzetti
96 pozzetti
96 pozzetti
