Immunohistochemistry / Immunofluorescence
I. Materiale richiesto
Reagenti
- Un anticorpo primario , marcato o meno, contro la molecola bersaglio
- Kit rivelazione
- Cromogeno
Buffer
- Xilene
- Bagni alcoolici al 70%, 80% e 95%
- Perossido di idrogeno (H2O2)
- Tris EDTA, Tris HCl
- Tween-20
Materiale
- Pipette e Pipet-aid
- Bagno d'acqua
II. Durata della sperimentazione
- 10 mn di blocco della perossidasi
- 30 mn di recupero antigenico
- 1 ora di incubazione dell...
Il principio dei kit di rilevazione ABC si basa sull'affinità dell'avidina (o della streptavidina) per la biotina. L'abbreviazione ABC sta infatti per Complesso Avidina/Biotina.
In generale, i kit di rilevamento ABC sono composti da:
- Un anticorpo secondario biotinilato
- Complesso avidina/enzima
I kit possono contenere o meno i tamponi di blocco e di diluizione e il substrato, a seconda dei formati.
I. Materiale richiesto
Reagenti
- Anticorpo primario
- Diluente per anticorpo primario
- Soluzione di pre-blocco
- Mezzo di montaggio
Buffer
- Tampone di lavaggio immunologico
- Xilene o reagenti deceranti
- Etanolo assoluto
- Acqua distillata o deionizzata
II. Durata della sperimentazione
- 10 mn di blocco
- 30-60 mn di incubazione delle sezioni con l...