Un nuovo strumento di screening altamente efficace che consente
determinazione della struttura in situ

 

Il metodo di cristallizzazione per contro-diffusione mescola direttamente il campione proteico e le soluzioni precipitanti mettendoli a contatto in una geometria ristretta. Non appena la proteina e la soluzione precipitante vengono caricate, si crea un gradiente di concentrazione continuo per diffusione liquido-liquido. Questo sistema consente di esplorare un'ampia gamma di condizioni di sovrasaturazione in un singolo esperimento, mantenendo i volumi dei campioni al minimo.

Il sistema CrystalChip è stato sviluppato da Claude Sauter (Institut de Biologie Moléculaire et Cellulaire IBMC, Strasburgo, Francia) e ha reso la controdiffusione direttamente disponibile ai ricercatori offrendo uno strumento di screening standardizzato e di facile utilizzo.

Caratteristiche e vantaggi

 

Esplora un continuum di condizioni di supersaturazione Richiede un volume minimo di campione Determinazione della struttura cristallina in situ Ideale per la cristallizzazione di biomacromolecole; visualizzazione e conservazione dei cristalli

Perché scegliere il CrystalChip per la cristallizzazione?

 

• Usare meno, ottenere di più: Grazie agli otto canali lunghi 4,5 cm, CrystalChip consente di esplorare un continuum di stati di supersaturazione. È altamente efficiente nello screening delle potenziali condizioni di nucleazione, utilizzando quantità minime di campione. Con soli 5 chip o 25 µl di proteina purificata, è possibile provare rapidamente 40 cocktail di cristallizzazione a concentrazioni infinite, invece di testare centinaia di condizioni individuali con metodi standard di diffusione del vapore o in batch.
• Semplificare il flusso di lavoro della biocristallografia: Il CrystalChip può essere facilmente posizionato su goniometri e traslato nel fascio di raggi X, consentendo analisi dirette dei cristalli all'interno del chip a temperatura ambiente e senza manipolazione.
• Aumentate la precisione della struttura 3D: Poiché tutte le analisi possono essere effettuate in situ, CrystalChip preserva la qualità del cristallo e le proprietà di diffrazione, evita i danni al cristallo dovuti alla manipolazione e consente la determinazione della struttura in condizioni più fisiologiche rispetto alla crio-cristallografia.

• CrystalChip è stato utilizzato con successo per cristallizzare diverse proteine solubili e di membrana (enzimi da soli e in complesso con substrati, nano-corpi, proteasi, lipasi, tRNA sintetasi ed emoglobina) e un duplex di RNA.

 

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