Servizio personalizzato : Produzione di monoclonali di lama
Servizi di costruzione e screening di librerie di anticorpi a dominio singolo di lama VHH
I nostri processi ottimizzati di costruzione delle librerie e di screening con tecnologia phage display garantiscono l'isolamento di cloni VHH ad alta affinità in tempi brevi.
Vantaggi degli anticorpi a dominio singolo VHH di lama:
- Gli anticorpi a dominio singolo VHH hanno una dimensione di soli 15kD, rispetto ai circa 150kD delle immunoglobuline tipiche.
- Le dimensioni ridotte degli anticorpi a dominio singolo consentono loro di inserirsi fisicamente in epitopi normalmente non accessibili agli anticorpi tradizionali, compreso il sito attivo di molti enzimi.
- Le dimensioni ridotte consentono inoltre di penetrare più rapidamente nei tessuti, attraversando anche prontamente la barriera emato-encefalica.
- Gli anticorpi VHH sono estremamente stabili e resistenti sia all'acidità che alla temperatura, potendo persino ripiegarsi in una proteina funzionale dopo la denaturazione.
- Gli anticorpi a dominio singolo hanno una solubilità molto elevata grazie alla maggiore idrofobicità.
- Le dimensioni ridotte e la stabilità rendono gli anticorpi VHH candidati ideali per applicazioni terapeutiche e diagnostiche.
Dettagli sulla produzione di anticorpi a dominio singolo VHH:
Immunizzazione dei lama
- Costruzione di librerie phage display: Monitoriamo il titolo anti-serum mediante ELISA e raccogliamo più emorragie di produzione e cellule PBMC durante l'immunizzazione. Le cellule PBMC vengono conservate in tampone di lisi dell'RNA in diversi momenti, in modo da preservare i repertori anticorpali durante il processo di immunizzazione. Al termine del protocollo di immunizzazione, il cliente può scegliere le PBMC in qualsiasi momento della raccolta per costruire la libreria.
- Screening della libreria VHH e determinazione dell'affinità: La libreria costruita sarà sottoposta a screening attraverso cicli multipli di legame/selezione per affinità con l'antigene. I cloni positivi saranno identificati mediante ELISA. I geni di questi cloni positivi saranno analizzati in sequenza. L'affinità di ciascun legante sarà determinata mediante ELISA. A seconda della complessità dell'antigene, verranno consegnati da uno a tre cloni con la migliore affinità.
- -Purificazione dell'anticorpo VHH su larga scala: Per ogni clone positivo, forniremo ~100ug di proteina purificata senza alcun costo aggiuntivo. Ulteriori anticorpi proteici sono disponibili a un costo aggiuntivo.
- Libreria di visualizzazione fagica VHH ingenua: La nostra nuovissima libreria VHH di lama non immunizzati copre repertori VHH ampi e diversificati che rappresentano oltre 2,0x109 cellule mononucleari periferiche di 20 lama non immunizzati. La libreria ha oltre 2x109 cloni indipendenti.