Kits pour la quantification de banques Illumina®
La quantification précise du nombre de molécules d'une banque est l'étape la plus critique parmi les étapes de préparation pour le séquençage nouvelle génération (NGS) pour obtenir des données de lecture de haute qualité. En effet, pour obtenir des données de lecture fiables et de qualité, il est nécessaire d'utiliser une quantité suffisante d'ADN, et en particulier pour le séquençage Illumina®. L'utilisation d'une quantité insuffisante d'ADN entraînera un rendement de séquençage faible et la surabondance d'ADN augmentera la densité du cluster et aboutira à des données de mauvaise qualité.
La PCR quantitative est considérée comme la méthode la plus précise et efficace de quantification de banque.
Les kits de quantification de banques pour le séquençage Illumina® contiennent tous les composants nécessaires pour la quantification par qPCR des banques :
- Mix qPCR contenant l'ADN polymérase, les dNTPs et le tampon
- Des amorces permettant d'amplifier uniquement les molécules qui contiennent les deux séquences d'adaptateurs
- Les standards ADN (S1 à S6)
- Une solution de ROX à ajouter en fonction de l'appareil utilisé. Si la solution de ROX est séparée du mix, il s'agit d'un kit universel pouvant être utilisé avec tous les appareils.
