Réactifs de transfection
La transfection est le processus qui vise à introduire du matériel génétique exogène sous forme d’ADN ou d’ARN dans des cellules eucaryotes. L’entrée de ce matériel génétique dans la cellule est permise par l’ouverture transitoire de pores dans les membranes, il est alors possible de faire entrer un plasmide, un petit ARN interférent ou autre. Les cellules manipulées pour accepter un acide nucléique étranger sont appelées cellules compétentes. Il ne faut pas confondre la transfection avec la transduction qui utilise une voie d’entrée différente dans la cellule (par l’utilisation de vecteur viral).
Il existe différentes méthodes de transfection, il s’agit de différents traitements chimiques et/ou physiques qui vont permettre de rendre la membrane plasmique plus perméable. Les principales méthodes utilisées sont :
- La précipitation avec du phosphate de calcium : l’ADN va ainsi adhérer à la membrane et entrer dans la cellule
- La lipofection qui va permettre d’associer l’ADN à des lipides cationiques, cela va créer des sortes de liposomes qui vont entrer dans la cellule par endocytose
- L’électroporation qui utilise une impulsion électrique pour dépolariser la membrane et ouvrir les pores
