Pfu polymérases
L'ADN polymérase Pfu à des propriétés de stabilité et de correction de erreurs supérieures comparée à d'autres polymérases thermostables
L'ADN polymérase Pfu, dérivée de l'archae hypertermophile Pyrococcus furiosus, à des propriétés de stabilité et de correction de erreurs supérieures comparées à d'autres polymérases thermostables. Son poids moléculaire est de 90 kDa. Elle est capable d'amplifier des fragments d'ADN allant jusqu'à 2kb. La vitesse d'allongement est d'environ 0,2 à 0, 4 kb/min à 70-75°C. L'ADN polymérase Pfu possède une activité de corrrection exonucléase 3'-5' qui lui permet de corriger les erreurs dues à la mauvaise incorporation des nucléotides. Ceci signifie que les fragments générés par PCR avec la polymérase Pfu comporteront moins d'erreurs que les inserts générés par PCR avec une Taq polymérase basique. L'utilisation de l'ADN polymérase Pfu dans vos réactions PCR permet d'obtenir des produits PCR à extrémités franches ce qui est idéal pour le clonage dans certains vecteurs. L'ADN polymérase Pfu est supérieure pour les techniques qui requièrent la synthèse d'un ADN avec une haute fidélité.
Caractéristiques
- L'activité exonucléase 3'-5' permet un faible taux d'erreurs.
- Il s'agit de l'une des ADN polymérases les plus stables.
- Optimal pour le clonage à bords francs
- Température optimale de 75°C
- Active à 95% après 1 heure d'incubation à 98°C.
Applications
- PCR Haute-Fidélité
- PCR Haute-Fidélité pour le clonage dans des vecteurs à bords francs.
- Mutagenèse dirigée