Production et purification de protéine en système procaryote

Production et purification de protéine en système procaryote

Nous proposons la production de protéine recombinante dans Escherichia Coli.

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Nous avons la possibilité de produire différentes quantités de protéine recombinante en fonction de vos projets.
Cette production est réalisée en deux étapes :
1- le test de l'expression de la protéine recombinante : pour vérifier la faisabilité de la demande
2- la production à grande échelle et la purification de la protéine

L'étape 2 de production ne sera lancée qu'après analyse des résultats de l'étape 1 et validation par le client.

Etape 1 - Protocole standard du test de l'expression de la protéine recombinante :
- Transformation de souches bactériennes à fort rendement
- Culture des bactéries (conditions de culture selon les quantités désirées)
- Induction de la synthèse des protéines (cinétique de 5 heures)
- Purification par affinité sur résine spécifique
- Analyse sur gel des lysats
Options : Analyse 1- de la solubilité de la protéine 2- du rendement de la production

Etape 2 - Protocole standard de production et de purification de la protéine recombinante à grande echelle :
- Culture bactérienne
- Induction de la synthèse de la protéine (selon le protocole standard décrit ci-dessus)
- Préparation des lysats bactériens
- Purification par affinité sur résine spécifique
- Option : Elimination du tag (ex : par clivage enzymatique du tag GST)

Note : La quantité finale de protéine ne peut pas être garantie.

Chiffres clefs :
- Volume de culture : Etape 1 : 300 mL / Etape 2 : 1 litre
- Cinetique d'expression de la protéine : 5 heures
- Durée du protocole : Etape 1 : 10 jours / Etape 2 : 5 jours

Prestations complémentaires disponibles :
=> Synthèse de gène
=> Clonage de gène
=> Production d'anticorps polyclonaux
=> Production d'anticorps monoclonaux