Réactifs et instruments pour l'immunologie, la biologie cellulaire et la biologie moléculaire.
 
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NeoPrep mini

NeoPrep mini

 

Description

  • Les kits miniprep (NB-60-0001) de Neo Biotech offrent un moyen rapide et efficace d'extraire l'ADN plasmidique pur d'Escherichia coli.
  • Le processus comprend la lyse alcaline des cellules bactériennes et la liaison de l'ADN à la silice dans des conditions de sel élevées.
  • L'ADN résultant est idéal pour la PCR, le séquençage fluorescent automatisé et diverses applications enzymatiques.
           

 

Conditions de stockage et préparation des réactifs

Tous les composants du kit peuvent être conservés à température ambiante (20-25 °C) et sont stables jusqu'à la date de péremption. Avant utilisation, ajouter 1 ml de tampon A1 au flacon de RNase A et vortexer. Transférer la solution résultante dans la bouteille de tampon A1 et bien mélanger. Le tampon A1 avec RNase doit être conservé à 4 °C pour une utilisation fréquente et à -20 °C pour une utilisation peu fréquente. Ajouter 32 ml d'éthanol de qualité biologie moléculaire à 100 % à chaque bouteille de tampon A4. Le tampon A2 peut former un précipité lors du stockage. Si nécessaire, dissoudre le précipité en chauffant la solution à 37 °C. Les tampons A3 et AY contiennent du chlorhydrate de guanidine. Portez des gants et des lunettes lorsque vous utilisez ce kit.

 

Composants du système

• Tampon A1 - 15 mL

• Tampon A2 - 15 mL

• Tampon A3 - 20 mL                  

 

• Tampon AY - 30 mL

• Tampon A4 (concentré) - 8 mL

• Tampon AE (ne contient pas EDTA) - 15 mL               

 

• RNase A - 5 mg

• Colonnes Spin Neo Biotech - 50

• Tubes de prélèvement (2 mL) - 50

 

 

Culture de cultures bactériennes :

  • Le milieu LB est recommandé pour la culture de cellules bactériennes, mais des milieux riches comme 2xYT ou TB peuvent également être utilisés.
  • Les médias riches favorisent une croissance plus rapide et une entrée précoce dans la phase stationnaire par rapport à LB.
  • Cependant, l'utilisation de milieux riches peut conduire à davantage de cellules mortes ou affamées, entraînant une dégradation partielle de l'ADN plasmidique et une contamination potentielle par l'ADN chromosomique.
  • Les cultures envahies peuvent contenir un matériel bactérien excessif, affectant les étapes de lyse et de précipitation.
  • Pour commencer, sélectionnez une seule colonie à partir d'une plaque sélective et inoculez 1 à 5 ml de milieu LB avec l'antibiotique approprié.
  • Incuber pendant 12 à 16 heures à 37°C sous agitation vigoureuse.