Multiplex immunoassays pour la cytométrie en flux

Multiplex immunoassays pour la cytométrie en flux

La technologie des AimPlex™ multiplex assay utilise des populations de billes de différentes tailles et présentant des intensités de fluorescence de différents niveaux. grâce à ces différences, il est possible de mesurer 24 analytes simultanément dans la même réaction. les populations de billes sont analysées par cytométrie en flux avec un laser de 488 nm. Le maximum d'émission est de 700 nm.

Le principe est le même que celui de l'ELISA sandwich, chaque population de billes est couplée à un anticorps de capture spécifique d'une protéine d'intérêt. La quantité d'analyte fixé est détectée grâce à un anticorps biotinylé dirigé contre un second épitope de la protéine et à une incubation avec de la R-phycoerythrine. L'intensité de la fluorescence de la R-phycoerythrine présente sur les billes est quantifiée par cytométrie en flux. Les concentrations de la protéine d'intérêt présente dans l'échantillon sont obtenues en comparant le signal fluorescent obtenu avec celui obtenu pour une serie de dilution de standard avec une concentration connue.

Le protocole comprend une incubation de 60 minutes de l'antigène et de l'anticorps de capture présent sur des billes, une incubation de 30 minutes avec l'anticorps de détection biotinylé et une incubation de 20 minutes avec la streptavidine-PE.

Retrouvez tous les produits AimPlex™ ICI



Protocole



Formats disponibles

SinglePlex Kits

Tous les AimPlex™ immunoassays disponibles sont regroupés par ensemble de 12-24 analytes.  Chaque analyte d'un groupe est analysé par une population de billes spécifique qui peut être combinée avec d'autres populations de billes spécifiques d'autres analytes.

Chaque Single Plex Kit comprend 1 ou plusieurs Analyte Kits, un Basic Kit et un Diluent Kit.  Chaque Analyte Kit contient un anticorps spécifique lié à une population de billes, un anticorps de détection et un standard ave cune concentration connue. Le Basic Kit comprend un diluant d'anticorps spécifique de l'espèce, un tzampon de lecture et un tampon de lavage, de la Streptavidine-PE (SAPE) et une plaque. Le Diluent Kit contient un diluant de standard spécifique du type d'échantillon et un diluant d'échantillon.

Premixed Multiplex Kits

Chaque Premixed Multiplex Kit contient un panel prédéfini de populations de billes pré-mélangées, d'antigènes et d'anticorps de détection. Tous les composants nécessaires sont fournis en format prêt-à-l'emploi sauf le tampon de lecture (10x) et le tampon de lavage (10x).

Panels et services à façon

Il est possible d'obtenir des panels à façon. Merci de nous contacter pour toute demande à tech@clinisciences.com.

Nous pouvons également vous fournir des formats plus importants (5 plaques). Merci de nous contacter pour plus de détails.

Spécifications
  • Types d'échantillons : Surnageant de culture, sérum, plasme, fluide biologique et lysat de tissue ou de cellules.
  • Sensibilité (LOD) : pour la plupart des tests < 10 pg/ml
  • Echelle de quantification ; LLOQ: < 20 pg/mL, ULOQ: > 5,000 pg/mL
  • Précision: Intra-assay CV: < 10%, Inter-assay CV: < 20%
  • Réactivité croisée des analytes dans un panel ou un groupe : Négligeable
  • Volume d'échantillon: 15 µL
Résultats représentatifs

Standards


Cytokines de souris

Questions fréquentes

Manuel d'utilisation : AimPlex Multiplex Immunoassay – Billes non-magnétiques

Publications

Video de démonstration