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ADN polymérases hot-start
L'ADN polymérase hot-start est une forme modifiée de l'ADN polymérase qui évite une amplification non-spécifique par l'inactivation de la taq polymérase à faible température. La PCR est une technologie de biologie moléculaire utilisée pour amplifier une séquence d'ADN en générant plusieurs millions de copies de cette séquence. Lors de la PCR hot-start, des anticorps spécifiques sont utilisés pour bloquer la Taq polymérase à faible température. Une étape initiale à 95°C est nécessaire pour dénaturer les anticorps liés à site actif de l'enzyme. les anticorps anti-Taq polymérase réduisent son activité en dessous de 72°C, la température optimale à laquelle l'enzyme prolonge les amorces. Quand les anticorps spécifiques se détachent de la Taq polymérase, celle-ci redevient active et peut procéder à l'amplification de la séquence cible.
Les Taq polymérases classiques sont actives à température ambiante. Dans ces conditions, lorsque tous les composants de la réaction sont mélangés ensemble, les amorces peuvent s'hybrider et la Taq polymérase peut commencer l'élongation de ces amorces, produisant ainsi des produits non spécifiques et réduisant la concentration des composants pour l'amplification de la séquence cible. La PCR hot-start réduit de façon significative l'amplification non spécifique.
Nous proposons un large choix de Taq polymérases hot-start. Vous trouverez ci-dessous une sélection avec les principales caractéristiques :
Nom | HS Taq DNA polymerase | AceTaq DNA polymerase | TransStart taq DNA polymerase |
Référence | NB-03-0103 to NB-03-0106 | P401 | AP141 |
Type | Taq polymerase | Taq polymerase | Taq Polymerase |
Vitesse | 0.9-1.2 kb/min | 1 kb/min | 1-2 kb/min |
Taille de l'amplicon | < 5kb | < 5kb | < 15 kb |
Activité exonucléase 5'-3' | Oui | Oui | Oui |
Activité exonucléase 3'-5' | Non | Oui | Non |
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