Tris(2-carboxyethyl)fosfine (TCEP) is een krachtig reductiemiddel dat veel wordt gebruikt in biologisch en biochemisch onderzoek. Het is bijzonder effectief bij het verbreken van disulfidebindingen in eiwitten en het behouden van een reducerende omgeving. Hier is een overzicht van de eigenschappen en toepassingen:

Chemische eigenschappen:

TCEP is een wateroplosbare verbinding met de chemische formule C9H15O6PS3. Het bevat een fosfinesgroep, die een krachtig reductiemiddel is. De fosfinesgroep kan elektronen afgeven om disulfidebindingen in eiwitten te breken, wat leidt tot de reductie van eiwitstructuren.

Biologische en biochemische toepassingen:

• Proteïnebiochemie: TCEP wordt veel gebruikt in de proteïnebiochemie om disulfidebindingen in eiwitten te reduceren. Dit is essentieel voor studies die eiwitvouwing, denaturatie of modificatie omvatten. TCEP wordt vaak geprefereerd boven andere reductiemiddelen zoals dithiothreitol (DTT) of 2-mercaptoethanol, omdat het geen thiolgroepen bevat en daarom geen S-methylatie of andere bijwerkingen veroorzaakt.

• Cultuur van cellen: In celkweek wordt TCEP gebruikt om een reducerende omgeving in media te behouden en de vorming van disulfidebindingen in eiwitten te voorkomen. Het kan worden toegevoegd aan celkweekmedia om cellen te beschermen tegen oxidatieve stress.

• Studie van nucleïnezuren: TCEP wordt gebruikt in nucleïnezurenstudies om disulfidebindingen te reduceren tijdens RNA- en DNA-extractieprocedures. Dit helpt de oxidatie van nucleïnezuren te voorkomen en hun integriteit te behouden tijdens isolatie.

• Massaspectrometrie: TCEP wordt gebruikt in massaspectrometrie-experimenten, vooral bij de analyse van eiwitten. Het gebruik ervan maakt het mogelijk om disulfidebindingen voor de analyse te reduceren, wat meer accurate informatie over de eiwitstructuur levert.

Veiligheidsmaatregelen:

TCEP wordt over het algemeen als veilig beschouwd om mee te werken, maar net als bij elk chemisch reagens moeten voorzorgsmaatregelen worden genome