De NAD⁺ kinase-activiteitsassay is een cruciale biochemische techniek die wordt gebruikt om de activiteit van NAD⁺ kinase te meten, een enzym dat verantwoordelijk is voor de fosforylering van NAD⁺ om NADP⁺ te produceren. Deze conversie is essentieel voor het handhaven van de balans van de NAD/NADP⁺-pool, die een belangrijke rol speelt in verschillende metabole processen, waaronder cellulaire ademhaling, lipidenbiosynthese en de regulatie van oxidatieve stress.

De assay omvat meestal het incuberen van een reactie mengsel dat NAD⁺, ATP en de enzymbron onder gecontroleerde omstandigheden bevat. Na incubatie wordt de reactie gestopt en kan het resulterende NADP⁺ worden gekwantificeerd met behulp van spectrofotometrische methoden of hoge-prestatie vloeistofchromatografie (HPLC). Een veelgebruikte benadering voor deze assay is het koppelen van de reactie met glucose-6-fosfaatdehydrogenase (G6PDH), waarbij de productie van NADP⁺ leidt tot de reductie van NAD⁺ naar NADH.

Deze assay is bijzonder waardevol in onderzoek gericht op metabole regulatie, kankercellenbiologie en het bestuderen van de effecten van verschillende verbindingen op de cellulaire stofwisseling. Bovendien heeft het begrijpen van NAD⁺ kinase-activiteit implicaties voor therapeutische strategieën die gericht zijn op metabole stoornissen en leeftijdsgerelateerde ziekten, waardoor het een essentieel hulpmiddel is in zowel fundamenteel als toegepast onderzoek.