Apoptose in real-time visualiseren met NucView

Apoptose in real-time visualiseren met NucView

De ENIGE caspasesubstraten voor realtime apoptosedetectie

NucView Caspase-3 Substraten bieden een gevalideerde oplossing voor real-time monitoring van apoptose in levende cellen met microscopie of flowcytometrie.

  
  • Eenvoudig: Geen wasbeurt, homogene assay voor real-time of eindpuntdetectie van apoptose in levende cellen
  • Snel en fixeerbaar: Formaldehyde fixeerbare kleuring in slechts 15 minuten
  • Niet giftig: Handig voor lange meerdaagse experimenten
  • 3 kleuropties: blauwe, groene of rode fluorescentie

 

Ontdek het hele assortiment

 
Verkrijgbaar in 10 µL formaat, test het!
 
Hoe werkt het?
 
Bij introductie in cellen is het NucView-substraat aanvankelijk niet-fluorescerend en kan het door het plasmamembraan dringen en het cytoplasma binnendringen. Tijdens apoptose splijt caspase-3/7 het substraat en komt de DNA-kleurstof met hoge affiniteit vrij, wat leidt tot nucleaire fluorescerende kleuring.
 
 
Over NucView®
 

NucView® substraten bestaan uit een fluorogene DNA-kleurstof gekoppeld aan de caspase-3/7 DEVD herkenningssequentie. Het substraat, dat aanvankelijk niet fluorescerend is, dringt door het plasmamembraan en komt in het cytoplasma terecht. In apoptotische cellen splitst caspase-3/7 het substraat, waarbij de DNA-kleurstof met hoge affiniteit vrijkomt, die naar de celkern migreert en het DNA met fluorescentie kleurt. NucView caspase-3 substraten zijn dus bifunctioneel, waardoor detectie van caspase-3/7 activiteit en visualisatie van morfologische veranderingen in de celkern tijdens apoptose mogelijk zijn.

 
In tegenstelling tot andere fluorogene caspasesubstraten of fluorescente assays op basis van caspaseremmers (FLICA), kunnen NucView® caspase-3-substraten worden gebruikt om caspase-3/7-activiteit te detecteren binnen individuele intacte cellen zonder de apoptoseprogressie te remmen. Kleuring is compatibel met daaropvolgende fixatie en permeabilisatie voor immunokleuring.
 
NucView® substraten worden aangeboden als oplossingen in DMSO of fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS). De substraten in PBS zijn geformuleerd voor gebruik in cellen die gevoelig zijn voor DMSO-toxiciteit. In niet-DMSO-gevoelige celtypen kan toevoeging van DMSO tijdens de substraatincubatie de kleuring met NucView® verbeteren.