Kit om celgroei te bepalen

Er is aangetoond dat celproliferatie meerdere functies heeft in ontwikkeling en patroonvorming, waaronder rollen in groei, morfogenese en genexpressie.
Veelgebruikte methoden hiervoor zijn hemocytometertelling, bepaling van het eiwitgehalte, nat- of drooggewichtmeting en bepaling van de optische dichtheid (OD). Terwijl hemocytometertelling en eiwitbepaling het nadeel hebben dat ze tijdrovend en vervelend zijn, is de meting van nat of zelfs droog gewicht niet praktisch voor zeer kleine kweekvolumes.
Een alternatieve methode is gebaseerd op de transformatie en colorimetrische kwantificering van MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-difenyltetrazoliumbromide. De ademhalingsketen en andere elektronentransportsystemen reduceren MTT en andere tetrazoliumzouten en vormen daarbij niet-wateroplosbare violette formazankristallen in de cel. De hoeveelheid van deze kristallen kan spectrofotometrisch bepaald worden en dient als schatting voor het aantal mitochondriën en dus het aantal levende cellen in het monster. Deze eigenschappen kunnen gebruikt worden in cytotoxiciteits- of celproliferatietests, die veel gebruikt worden in immunologie, toxicologie en celbiologie.

Principe : 
Het principe van de MTT-test is gebaseerd op mitochondriale activiteit. Voor levensvatbare cellen is de mitochondriale activiteit constant en daarom is een toename of afname van het aantal levensvatbare cellen lineair gerelateerd aan de mitochondriale activiteit. De mitochondriale activiteit van de cellen wordt weergegeven door de omzetting van het tetrazoliumzout MTT in formazankristallen, die kunnen worden opgelost voor homogene metingen. Zo kan elke toe- of afname in het aantal levensvatbare cellen worden gedetecteerd door de formazanconcentratie spectrofotometrisch te meten met een plaatlezer bij 570 nm vs 690 nm.

Onderdelen van de kit :  MTT-oplossing + MTT-oplosmiddel