Eiwitproductie

Recombinante eiwitten worden veel gebruikt als hulpmiddelen voor onderzoek in de biologie. De productie ervan vereist een zekere expertise, ook al is de ontwikkeling vrij eenvoudig en zijn er veel hulpmiddelen op de markt.

 

Eiwitproductie is het biotechnologische proces waarbij een specifiek eiwit wordt geproduceerd. Het wordt meestal verkregen door genexpressie in een organisme zodanig te manipuleren dat het grote hoeveelheden van een recombinant gen tot expressie brengt. Dit omvat de transcriptie van recombinant DNA in boodschapper-RNA (mRNA), de translatie van mRNA in polypeptideketens, die uiteindelijk opgevouwen worden tot functionele eiwitten en gericht kunnen worden op specifieke subcellulaire of extracellulaire locaties. De volgende stap is de zuivering van het tot expressie gebrachte eiwit.

 

De moeilijkheid van eiwitproductie hangt samen met de moeilijkheid van het beoordelen en maken van strategische keuzes. De te stellen vragen zijn als volgt:

• Moet het eiwit tot expressie worden gebracht in bacteriën, gisten, insectencellen of menselijke cellen?
• Welke expressievector moet worden gebruikt?
• Als voor bacteriële productie wordt gekozen, welke kleurstoffen moeten dan worden gebruikt?
• Wil je een heel eiwit of een stukje eiwit tot expressie brengen?
• Moet het eiwit gelabeld worden en welke marker is het meest geschikt?
• Wat is de juiste zuiveringsstrategie?

 

Omdat alle eiwitten verschillend zijn, is er geen goed antwoord op deze vragen. De strategieën die gekozen worden voor de verschillende stadia van eiwitproductie hangen af van verschillende factoren, zoals het eiwit zelf en het gebruik van dit eiwit stroomafwaarts.