Complementfixatietest (CFT)

Schimmelantigenen en positieve controles worden gebruikt om antilichamen in patiëntsera te detecteren met behulp van de complementfixatieprocedure (CF) om de diagnose van vier specifieke schimmelziekten te ondersteunen: histoplasmose, blastomycose, coocidioidomycose en aspergillose.

 

Het principe van de CF-test is dat antilichamen in sera van patiënten, wanneer ze gemengd worden met de overeenkomstige antigenen, complement (een bestanddeel van vers serum) zullen 'fixeren', of binden. Complementbinding wordt bepaald met een testsysteem dat bestaat uit rode bloedcellen van schapen (SRBC's) die gesensibiliseerd zijn met anti-SRC (hemolysine) en waarbij het percentage lysis van de SRBC's wordt gemeten (ongebonden complement initieert lysis). Als al het complement "gefixeerd" is, zijn de SRBC-cellen niet gelyseerd.

 

 

1. Complement (C) wordt onomkeerbaar gebonden (gefixeerd) door bepaalde klassen antilichaam-antigeencomplexen (sommige klassen antilichaam fixeren complement niet). De mate van binding hangt af van de relatieve concentratie van antilichaam of antigeen.

 

2. Lysis van SRBC's die gesensibiliseerd zijn voor hemolysine is afhankelijk van de aanwezigheid van ongebonden complement.

 

De CF-test wordt als volgt geïnterpreteerd:

Patiëntsera moeten worden getest met elk van de antigenen, aangezien er enige overlap is in antigeniciteit tussen de verschillende schimmels en de ziektesymptomen erg op elkaar lijken. Hogere CF-titers worden meestal gezien op patiëntsera als ze getest worden tegen hetzelfde antigeen als het etiologische agens van hun infecties.

 

 

 

Deze antigenen zijn vooraf verdund tot de optimale concentratie voor gebruik in de LBCF-procedure en zijn klaar voor gebruik zoals ze worden geleverd. De optimale verdunningen voor deze antigenen zijn bepaald door "kastitratie" met sera van bewezen mycosegevallen met bekende titers. Optimaal verdunde antigenen zijn als volgt verkrijgbaar:

 

 

Positieve controles zijn afkomstig van gehyperimmuniseerde geiten. Elke positieve controle moet een titer geven van 1:32 (+/- 1 verdunning) met het optimaal verdunde homologe antigeen. De negatieve controle moet negatief zijn in de CF-test met alle antigenen.