Immunohistochemistry / Immunofluorescence
I. Vereist materiaal
Reagentia
- Een primair antilichaam ,al dan niet gelabeld, tegen de doelmolecule
- Openbaring kit
- Chromogen
Buffers
- Xyleen
- Alkoholische baden van 70%, 80% en 95%
- Waterstofperoxide (H2O2)
- Tris EDTA, Tris HCl
- Tween-20
Materiaal
- Pipetten en Pipet-aid
- Waterbad
II. Experimenteerlengte
- 10 mn van peroxydase blokkering
- 30 mn antigenische retrieval
- 1 uur incubatie van primair antilichaam
-...
Het principe van ABC-detectiekits is gebaseerd op de affiniteit van avidine (of streptavidine) voor biotine. De afkorting ABC staat inderdaad voor Avidine/Biotine Complex.
In het algemeen bestaan de ABC-detectiekits uit:
- Een gebiotinyleerd secundair antilichaam
- Een avidine/enzymcomplex
De kits kunnen al dan niet de blokkeer- en verdunningsbuffers en het substraat bevatten, afhankelijk van de formaten.
I. Vereist materiaal
Reagentia
- Primair antilichaam
- Primair antilichaam Verdunner
- Pre-blocking oplossing
- Montage medium
Buffers
- Immuno wasbuffer
- Xyleen of wasmiddelen
- Absolute ethanol
- Gedestilleerd of gedeïoniseerd water
II. Experimenteerlengte
- 10 mn van het blokkeren
- 30-60 mn incubatie van secties in primair antilichaam
-...