Sondas para hibridização in situ

A Hibridação In situ (ISH) é uma técnica laboratorial destinada a localizar alvos específicos de ácido nucleico de cadeia única numa secção histológica de tecido ou células fixas. Para tal, utilizamos uma pequena sequência complementar ao alvo chamada sonda.

Existem 2 tipos de hibridação in situ que se diferenciam por etiqueta utilizada para visualizar o ARN e os alvos de ADN. Por um lado o FISH (Fluorescent in situ hybridization) se a sonda for rotulada com um fluorocromo e por outro lado o CISH (Chromogenic in situ hybridization) se a sonda for rotulada com um cromogéneo. Estes 2 tipos de HIS baseiam-se no mesmo princípio, mas as características inerentes a cada método de detecção fazem com que o FISH e o CISH se destinem a aplicações muito diferentes. Além disso, os instrumentos utilizados para visualizar os resultados não são os mesmos, dependendo do método utilizado: microscopia de campo brilhante para CISH e microscopia de fluorescência para FISH.