Câmara de Boyden
A câmara de Boyden é uma ferramenta útil para estudar a migração e a invasão celular. Consiste numa inserção cilíndrica de cultura de células aninhada no interior de um poço de uma placa de cultura de células. A inserção contém uma membrana de policarbonato na parte inferior com um tamanho de poro definido.
As células são semeadas na parte superior do inserto em meios sem soro, enquanto o soro ou quimioatractores semelhantes são colocados no poço inferior. As células migratórias deslocam-se através dos poros em direção ao quimioatractor inferior e podem ser coradas ou quantificadas num leitor de placas. As células invasivas podem ser medidas de forma semelhante através da colocação de um revestimento de proteínas da matriz extracelular no topo da membrana.
Os ensaios em câmara de Boyden podem ser utilizados para medir a invasão celular, bem como vários tipos de migração celular:
As células são semeadas na parte superior do inserto em meios sem soro, enquanto o soro ou quimioatractores semelhantes são colocados no poço inferior. As células migratórias deslocam-se através dos poros em direção ao quimioatractor inferior e podem ser coradas ou quantificadas num leitor de placas. As células invasivas podem ser medidas de forma semelhante através da colocação de um revestimento de proteínas da matriz extracelular no topo da membrana.
Os ensaios em câmara de Boyden podem ser utilizados para medir a invasão celular, bem como vários tipos de migração celular:
- A quimiotaxia descreve a migração celular com base em substâncias químicas presentes no ambiente circundante de uma célula. A quimiotaxia celular pode indicar a migração em direção a um determinado sinal químico ou para longe dele.
- A haptotaxia é definida como a migração celular ao longo de um gradiente de quimioatractores ligados à matriz extracelular. Nestes ensaios, o inserto da câmara de Boyden é revestido na parte inferior com colagénio I ou proteína fibronectina.
- A transmigração descreve a migração de células (normalmente leucócitos ou células tumorais) através do endotélio vascular em direção a um quimioatractor.
Tipo de ensaio
Tipos de células
Tamanho do poro
Revestimento
Formatos
Quimiotaxia
Leucócitos
3 µm
Nenhum
24 poços
Neutrófilos
96 poços
Linfócitos
5 µm
Nenhum
24 poços
Macrófagos
96 poços
Monócitos
Células endoteliais
8 µm
Nenhum
24 poços
Células epiteliais
96 poços
Fibroblastos
Células tumorais
Astrocytes
12 µm
Nenhum
24 poços
Células de movimento lento
Haptotaxia
Células endoteliais
8 µm
Colagénio I (fundo)
24 poços
Células epiteliais
Fibroblastos
Fibronectina (fundo)
24 poços
Transmigração
Leucócitos
3 µm
Nenhum
24 poços
Células tumorais
8 µm
Nenhum
24 poços
Invasão
Células endoteliais
Células epiteliais
Células epiteliais
8 µm
Matriz extracelular (topo)
24 poços
96 poços
96 poços
Fibroblastos
Células tumorais
Células tumorais
Colagénio I (topo)
24 poços
96 poços
96 poços
Laminina I (topo)
24 poços
96 poços
96 poços