Kits de deteção IHC à base de polímeros - Tecidos humanos - IgG anti-humana - Peroxidase de rábano (HRP)

Os sistemas de deteção IHC baseados em polímeros consistem num polímero de uma enzima ativa ligada a um anticorpo secundário específico de um anticorpo primário alvo. Este formato permite um aumento significativo da quantidade de enzima presente no local de localização e, por conseguinte, um sinal mais elevado através da conversão de mais substrato em precipitado. Além disso, este sistema permite um protocolo de uma só etapa em vez das duas etapas previstas pelo sistema ABC (anticorpo biotinilado + complexo avidina-enzima).

 

A deteção do antigénio com o anticorpo primário da mesma espécie que o tecido a testar produz um fundo elevado quando se utiliza o método de deteção indireta. Este facto limita severamente a utilização do rastreio de anticorpos humanos em tecidos humanos. Os nossos kits foram concebidos para a coloração de anticorpos primários humanos em tecido humano sem coloração de fundo. O kit NeoKlear Human HRP-Polymer Detection fornece tampões de bloqueio especiais, anticorpo secundário polimérico ligado à HRP e primers humanos num sistema pronto a usar. Esta tecnologia requer uma pré-incubação nocturna com o anticorpo primário, o que resulta numa excelente sensibilidade e numa elevada especificidade. Trata-se de um sistema isento de biotina, pelo que ultrapassa a coloração não específica causada pelo sistema estreptavidina/biotina devido à biotina endógena.

 

Os substratos de fosfatase alcalina mais vulgarmente utilizados são o Fast Red e o Permanent Red. Estes dois substratos formam precipitados vermelhos insolúveis em água quando são hidrolisados pela fosfatase alcalina (AP). É por esta razão que são vulgarmente designados por cromogéneos. A localização das proteínas alvo é efectuada através da visualização microscópica dos precipitados no tecido.

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