Resinas de cromatografia
O princípio da cromatografia baseia-se em 2 fases: a fase móvel que conduz a amostra e a fase estacionária que permite a sua purificação. As resinas cromatográficas constituem esta fase estacionária.
Existem diferentes tipos de cromatografia, consoante o tipo de resina utilizado. Os quatro principais tipos de cromatografia incluem a cromatografia de afinidade, a cromatografia de permuta iónica (IEX), a cromatografia de interação hidrofóbica (HIC) e a cromatografia de exclusão de tamanho (SEC). A maioria dos sistemas de purificação requer a utilização de vários destes tipos de procedimentos cromatográficos para atingir a pureza necessária para as aplicações a jusante. A escolha do(s) método(s) cromatográfico(s) mais adequado(s) e a ordem desses métodos é essencial para a otimização de um método de purificação de proteínas.
Tipo de cromatografia | Princípio da separação | Interação | Eluição |
Afinidade | Interação específica | Sem ligando competitivo | Ligante competitivo (específico), quebra das interacções proteína/proteína por alteração das condições (não específico) |
Troca de iões | Carga superficial líquida | Baixa força iónica | Força iónica elevada, aumento (catiões) ou diminuição (aniões) do pH |
Interacções hidrofóbicas | Hidrofobicidade | Elevada força iónica | Baixa força iónica |
Exclusão de tamanho | Raio hidrodinâmico |