Preparação do tecido
Para tornar visível o que queremos observar, é necessário implementar várias técnicas que aplicamos ao material, o que se chama preparação das amostras. Para observação em microscopia ligeira ou microscopia electrónica, as secções de tecido examinadas são o resultado de procedimentos técnicos que requerem várias etapas sucessivas: fixação, inclusão, corte, coloração, montagem.
A preparação das amostras histológicas pode variar muito dependendo das propriedades intrínsecas das amostras, tais como o tamanho, mas também de acordo com os objectivos do exame (diagnóstico histopatológico em humanos ou animais ou protocolo de investigação) e procedimentos a jusante desta preparação.
O objectivo da fixação é a preservação das estruturas. Com efeito, a recolha de tecidos provoca a sua morte: as células descarregam as suas enzimas, o que provoca uma auto-regulação do tecido. Além disso, no ar ambiente, as amostras podem ser contaminadas com bactérias.
O objectivo da fixação é a preservação das estruturas. Com efeito, a recolha de tecidos provoca a sua morte: as células descarregam as suas enzimas, o que provoca uma auto-regulação do tecido. Além disso, no ar ambiente, as amostras podem ser contaminadas com bactérias.
Os cortes do bloco de parafina são feitos com um microtomo que permite fazer cortes de secção suficientemente finos para serem observados por microscopia. A espessura das secções depende da técnica de microscopia utilizada.
As manchas feitas nas lâminas, acentuam os contrastes para melhor reconhecer os diferentes elementos da preparação.
Finalmente, a montagem é o último passo antes da observação.