Transformação
A transformação de células normais em células neoplásicas ocorre através de uma série de alterações genéticas e epigenéticas, resultando numa população de células capaz de proliferar independentemente de sinais internos e externos que normalmente restringem o seu crescimento. Tradicionalmente, o teste de formação de colónias em ágar mole era utilizado para monitorizar a transformação celular e o crescimento independente da ancoragem, com contagem manual das células proliferadas após 3-4 semanas de crescimento celular.
Os nossos kits convencionais de ensaio de transformação celular em ágar macio não envolvem a contagem manual subjectiva de colónias e não requerem um período de incubação de 3 a 4 semanas. Em vez disso, as células são incubadas apenas 6-8 dias num meio de ágar semi-sólido antes de serem solubilizadas, lisadas e detectadas por um fluorocromo.
Os resultados são lidos num leitor de placas de fluorescência (ver princípio de ensaio abaixo). Este formato proporciona um método quantitativo de elevado rendimento para medir com precisão a transformação celular. Além disso, o curto tempo de incubação (6-8 dias) permite ensaiar células transientemente transfectadas com oncogenes ou siRNAs.
Vantagens:
- Utiliza uma matriz tradicional de ágar mole
- Quantificação da transformação celular sem contagem manual de células
- Resultados em 7-8 dias, em comparação com 3 semanas para os métodos convencionais
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