Sequenciação de Proteínas de Anticorpos
Conhecer a sequência do seu anticorpo monoclonal não é apenas o primeiro passo para a engenharia de anticorpos e otimização da função, mas também é fundamental para o pedido de patente
O utilizador fornece:
Amostra de anticorpo monoclonal (>0,2mg, >95%puro)
Nós entregamos:
- Sequência completa das cadeias pesadas e leves
- Cobertura completa da sequência por LC-MS/MS
- Relatório exaustivo
- Dados brutos LC-MS/MS
Principais benefícios
- A capacidade de reconstruir o hibridoma a partir da amostra de anticorpo monoclonal
- Determinar com exatidão as regiões CDR
- Análises exaustivas para confirmar o seu produto de anticorpo, incluindo sequência primária, PTMs, glicosilação e variação de sequência.
Visão geral do serviço
Oferecemos um serviço de sequenciação de novo de anticorpos. Sequenciamos diretamente a proteína do anticorpo utilizando digestão enzimática múltipla e LC-MS/MS de alta resolução. O nosso serviço garante a sequenciação de todo o comprimento das cadeias pesadas e leves.
O nosso processo de sequenciação não requer hibridoma, mRNA ou outras informações de sequência. Fornece uma visão direta e independente da sua amostra de anticorpos.
Exato – Garantimos uma cobertura de pelo menos 5X dos CDRs nas regiões variáveis. Cada aminoácido nos CDRs é suportado com confiança por iões de fragmento em pelo menos cinco análises MS2. Para Leu e Ile isoméricos, esforçamo-nos por fazer a inferência correcta a partir da especificidade enzimática e das estatísticas da base de dados de anticorpos.
Abrangente – Como opção, oferecemos a caraterização completa da proteína do anticorpo. O nosso serviço inclui a análise de PTMs, glicosilação, pontes dissulfureto, contaminantes e outros aspectos personalizados de acordo com as suas necessidades.
Eficiente – Utilizamos uma quantidade mínima de amostra de anticorpos (0,2 mg) e fornecemos resultados no prazo de 15 dias úteis com uma qualidade consistente.
Método
O nosso procedimento padrão consiste nas seguintes etapas.
- Digerir a proteína do anticorpo em péptidos sobrepostos com múltiplas enzimas.
- Analisar as digestões com LC-MS/MS utilizando um espetrómetro de massa Thermo Orbitrap.
- Caracterizar os péptidos sobrepostos com sequenciação de péptidos de novo.
- Montagem automatizada da sequência de anticorpos a partir de péptidos caracterizados.
- Análise e anotação de resultados pelos nossos cientistas.
