Produção de proteínas

As proteínas recombinantes são amplamente utilizadas como ferramentas de investigação em biologia. A sua produção requer um certo grau de especialização, mesmo que o desenvolvimento seja bastante simples e existam muitas ferramentas no mercado.

 

A produção de proteínas é o processo biotecnológico de produção de uma proteína específica. É normalmente obtida através da manipulação da expressão genética num organismo, de modo a que este expresse grandes quantidades de um gene recombinante. Isto inclui a transcrição do ADN recombinante em ARN mensageiro (ARNm), a tradução do ARNm em cadeias polipeptídicas, que são finalmente dobradas em proteínas funcionais e podem ser direccionadas para locais subcelulares ou extracelulares específicos. O passo seguinte é a purificação da proteína expressa.

 

A dificuldade da produção de proteínas depende da dificuldade de avaliar e fazer escolhas estratégicas. As questões a colocar são as seguintes:

• A proteína deve ser expressa em bactérias, leveduras, células de insectos ou células humanas?
• Que vetor de expressão deve ser utilizado?
• Se a produção bacteriana for mantida, que corantes devem ser utilizados?
• Pretende exprimir uma proteína inteira ou um pedaço de proteína?
• A proteína deve ser marcada e qual o marcador mais adequado?
• Qual é a estratégia de purificação correcta?

 

Uma vez que todas as proteínas são diferentes, não existe uma resposta correcta para estas questões. As estratégias escolhidas para as diferentes fases da produção de proteínas dependerão de vários factores, tais como a própria proteína e a utilização desta proteína a jusante.