Neogreen qPCR Master Mix (2x)
Descrição
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Temperatura de armazenamento
Armazenar a qPCR Green Master Mix (2x) a -30 a -15 °C num congelador a temperatura constante. Minimizar os ciclos de congelação-descongelação, armazenando em alíquotas de trabalho. Proteger da luz.
Instrumentos de PCR em tempo real compatíveis
- Bio-Rad: CFX96™, CFX384™, Opticon™, Opticon™ 2
- Qiagen (Corbett): Rotor-Gene™ 3000, 6000 & Q
- Roche: Lightcycler® 96, 480 & Nano
- Applied Biosystems (com adição opcional de ROX ou ROX OFF): 7000, 7300, 7700, 7900, 7900HT, 7900HT FAST, StepOne™ & StepOne™plus, 7500, 7500 FAST, QuantStudio™ 5, 6, 7, 12k Flex & ViiA7™
Ensaios de controlo de qualidade
- Contaminação do ADN genómico:
O qPCR Green Master Mix é analisado para detetar a presença de ADN genómico bacteriano. Podem ser detectadas quantidades vestigiais de gDNA de E. coli através de um ensaio de PCR em tempo real altamente sensível, utilizando primers específicos para o gene 16S rRNA de E. coli. Os limites aceitáveis são estabelecidos de acordo com a quantidade de ADN contaminante até uma quantidade não suficiente para originar um sinal positivo.
- Ensaios de nuclease:
Para testar a contaminação por DNase, 0,2-0,3 μg de ADN plasmídico pNZY28 são incubados com a mistura principal durante 14-16 h a 37 °C. Para testar a contaminação por RNase, 1 μg de ARN é incubado com a mistura principal durante 1 h a 37 °C. Após a incubação, os ácidos nucleicos são visualizados num gel de agarose com GreenSafestained. Os ácidos nucleicos não devem apresentar cortes ou cortes visíveis.
- Ensaio funcional :
Os qPCR Green Master Mixes são extensivamente testados quanto à atividade, processividade, eficiência, sensibilidade e ativação pelo calor.