Visualize a apoptose em tempo real com o NucView
Os ÚNICOS substratos de caspase para deteção de apoptose em tempo real
Os substratos NucView Caspase-3 oferecem uma solução validada para a monitorização em tempo real da apoptose em células vivas por microscopia ou citometria de fluxo.
- Simples: Ensaio homogéneo, sem lavagem, para deteção de apoptose em tempo real ou de ponto final em células vivas
- Rápido e fixável: Coloração fixável com formaldeído em apenas 15 minutos
- Não tóxico: Útil para experiências longas de vários dias
- 3 opções de cor: fluorescência azul, verde ou vermelha
Disponível no formato de 10 µL, teste-o!
Como é que funciona?
Quando introduzido nas células, o substrato NucView é inicialmente não fluorescente e consegue penetrar na membrana plasmática e entrar no citoplasma. Durante a apoptose, a caspase-3/7 cliva o substrato e liberta o corante de ADN de elevada afinidade, o que leva à coloração fluorescente nuclear.
Acerca do NucView
Os substratos NucView® consistem num corante de ADN fluorogénico acoplado à sequência de reconhecimento DEVD da caspase-3/7. O substrato, que inicialmente não é fluorescente, penetra na membrana plasmática e entra no citoplasma. Nas células apoptóticas, a caspase-3/7 cliva o substrato, libertando o corante de ADN de elevada afinidade, que migra para o núcleo da célula e cora o ADN com fluorescência. Assim, os substratos NucView caspase-3 são bifuncionais, permitindo a deteção da atividade da caspase-3/7 e a visualização de alterações morfológicas no núcleo durante a apoptose.
Ao contrário de outros substratos de caspase fluorogénicos ou ensaios baseados em inibidores de caspase fluorescentes (FLICA), os substratos de caspase-3 NucView® podem ser utilizados para detetar a atividade da caspase-3/7 em células individuais intactas sem inibir a progressão da apoptose. A coloração é compatível com a subsequente fixação e permeabilização para coloração imunológica.
Os substratos NucView® são oferecidos como soluções em DMSO ou solução salina tamponada com fosfato (PBS). Os substratos em PBS são formulados para utilização em células sensíveis à toxicidade do DMSO. Em tipos de células não sensíveis ao DMSO, a adição de DMSO durante a incubação do substrato pode melhorar a coloração NucView®.