Test de fixation du complément (CFT) pour la mycologie

Les antigènes fongiques et les contrôles positifs sont utilisés pour détecter les anticorps dans le sérum du patient par la procédure de fixation du complément (CF) pour faciliter le diagnostic de quatre maladies fongiques spécifiques: histoplasmose, blastomycose, coocidioïdomycose et aspergillose.

 

Le principe du test CF est que les anticorps présents dans les sérums des patients, lorsqu'ils sont mélangés avec les antigènes correspondants, vont "fixer", ou lier, le complément (un composant de sérum frais). La "fixation" du complément est déterminée en utilisant un système de dosage constitué de globules rouges de mouton (SRBC) sensibilisés par l'anti-SRC (hémolysine) et en mesurant le pourcentage de lyse des SRBC (le complément non lié initie la lyse). Si tout le complément a été "fixé", les cellules SRBC ne seont pas lysé.

 

 

1. Le complément (C) est lié de manière irréversible (fixe) par certaines classes de complexes anticorps-antigène (certaines classes d'anticorps ne fixent pas le complément). Le degré de fixation dépend de la concentration relative d'anticorps ou d'antigène

 

2. La lyse des SRBC qui ont été sensibilisées à l'hémolysine dépend de la présence de complément non lié.

 

 

Les sérums des patients doivent être testés avec chacun des antigènes, car il existe un certain chevauchement dans l'antigénicité entre les différents champignons et les symptômes des maladies sont très similaires. Des titres de FC plus élevés sont habituellement observés sur les sérums de patients lorsqu'ils sont testés contre le même antigène que l'agent étiologique de leurs infections.

 

 

 

Ces antigènes sont prédilués à la concentration optimale pour une utilisation dans la procédure LBCF et sont prêts à l'emploi tel qu'ils sont fournis. Les dilutions optimales pour ces antigènes ont été déterminées par «titrage en boîte» contre des sérums provenant de cas avérés de mycoses avec des titres connus. Les antigènes optimalement dilués sont disponibles comme suit:

 

 

Les contrôles positifs proviennent de chèvres hyperimmunisées. Chaque contrôle positif devrait donner un titre de 1:32 (dilution de +/- 1) avec son antigène homologue dilué de manière optimale. Le contrôle négatif devrait être négatif dans le test CF avec tous les antigènes.